多肽芯片具有體積小、重量輕、成本低、便于攜帶、通量高、分析過程自動(dòng)化、分析速度快、所需樣品少等優(yōu)點(diǎn),在生命科學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用日益廣泛。目前,多肽芯片的制備常常受限于多肽配體的組成及其在芯片表面的密度及取向等。
日前,中國(guó)科學(xué)院青島生物能源與過程研究所生物傳感技術(shù)團(tuán)隊(duì)博士研究生祁環(huán)等以纖維素酶系的內(nèi)切葡聚糖酶I(EG I)為模型,與f8/8風(fēng)景噬菌體文庫(kù)進(jìn)行生物淘選,篩選獲得了特異性結(jié)合EG I的八肽配體EGSDPRMV探針;并借助對(duì)稱載體Ff噬菌體,高密度、定向固定于芯片表面,成功制備了高性能多肽芯片。相關(guān)成果在線發(fā)表于Analytical Chemistry (H.Qi, et al., Analytical Chemistry 2014)。
研究人員發(fā)現(xiàn),基于噬菌體EGSDPRMV探針的多肽芯片,其熒光信號(hào)強(qiáng)度是傳統(tǒng)多肽芯片(pVIII-EGSDPRMV)的4倍多,且熒光信號(hào)均一,表明通過對(duì)稱性載體Ff噬菌體固定多肽探針?biāo)苽涞亩嚯男酒,其性能明顯優(yōu)于依賴傳統(tǒng)方式制備的多肽芯片。此外,基于Ff噬菌體制備的多肽芯片,表現(xiàn)出靈敏度高、重現(xiàn)性好等優(yōu)異分析性能。該纖維素酶檢測(cè)芯片的開發(fā)成功對(duì)基于纖維素酶的生物能源相關(guān)研究具有重要意義。
上述研究由劉愛驊研究員主持完成,美國(guó)奧本大學(xué) Valery A. Petrenko 教授參與研究,得到了國(guó)家自然科學(xué)基金、中科院“百人計(jì)劃”項(xiàng)目等的資助。

(A)多肽芯片點(diǎn)制模式,其中1代表pVIII-EGSDPRMV,2代表噬菌體EGSDPRMV;(B)與熒光染料Cy3標(biāo)記的EG I(100 nM)孵育后的芯片掃描圖;(C) B圖熒光信號(hào)的量化分析。
