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天津工生所建立雙酶共表達(dá)體系制備富含稀少糖的高果糖漿

 D-阿洛酮糖是近年發(fā)現(xiàn)的一種具有特殊保健功能的新型功能性單糖,其甜度相當(dāng)于蔗糖70%,具有高溶解度、極低的熱量值和低血糖反應(yīng),可作為食品中蔗糖理想的替代品。2011年8月,美國(guó)食品與藥物管理局(FDA)確定D-阿洛酮糖為普遍公認(rèn)安全食品(GRAS),并可作為食品或食品添加劑的組成成分,在膳食、保健、醫(yī)藥等領(lǐng)域擁有廣闊的應(yīng)用前景。

  果葡糖漿也稱(chēng)高果糖漿(High Fructose corn syrup)或異構(gòu)糖漿,是以淀粉為原料生產(chǎn)一種含有果糖與葡萄糖的混合糖漿,由于高果糖漿過(guò)量攝入導(dǎo)致肥胖、甘油三酯升高,影響人類(lèi)健康。

  中國(guó)科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所孫媛霞研究員帶領(lǐng)的功能糖與天然活性物質(zhì)研究組建立了雙酶共表達(dá)體系制備富含稀少糖的高果糖漿。研究人員通過(guò)從嗜熱枯草菌和瘤胃菌中分別獲得D-葡萄糖異構(gòu)酶(BGI)和D-阿洛酮糖3-差向異構(gòu)酶(RDPE)基因,構(gòu)建了共表達(dá)體系,完成了從D-葡萄糖轉(zhuǎn)化形成D-阿洛酮糖的雙酶偶聯(lián)反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)證明,BGI和RDPE共表達(dá)體系在60℃仍具有較好熱穩(wěn)定性,以高果糖漿為底物,反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí),高果糖漿中的葡萄糖、果糖和D-阿洛酮糖的摩爾比為3.0 : 2.7 : 1.0, D-阿洛酮糖的產(chǎn)量為135g/L,占總糖漿的15%。

  研究開(kāi)發(fā)新型的“健康糖”,將高果糖漿中的葡萄糖、果糖利用酶法異構(gòu),轉(zhuǎn)化生成一種零卡路里并且能夠改善腸道菌群、降低血糖、抗齲齒的甜味劑—D-阿洛酮糖,對(duì)改善人類(lèi)健康具有重要意義。

  該研究獲得國(guó)家自然科學(xué)基金、“863”計(jì)劃項(xiàng)目的支持,相關(guān)研究成果已經(jīng)發(fā)表在Enzyme and Microbial Technology,天津工生所門(mén)燕為第一作者。

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反應(yīng)方程式 

 

共表達(dá)載體的構(gòu)建以及目的蛋白的表達(dá)