近日，中國科學技術(shù)大學滕脈坤教授和李旭博士研究組在大腸桿菌DNA損傷修復(fù)過程中重要組件引發(fā)體蛋白DanT與單鏈DNA復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)中，發(fā)現(xiàn)了一種全新的三螺旋束與單鏈DNA的結(jié)合模式，闡明了DanT與單鏈DNA之間的相互識別分子機制。7月22日Nucleic Acids Research 在線發(fā)表了該研究成果，論文的第一作者為課題組博士生劉崢。

　　遺傳信息的忠實可靠傳遞離不開細胞對染色體復(fù)制過程的精確協(xié)同調(diào)控，其中，復(fù)制起始階段的復(fù)制復(fù)合物組裝過程通常由引發(fā)體負責調(diào)控。引發(fā)體通常由多種蛋白組裝而成，包括解旋酶、引發(fā)酶和其他一些用于生成RNA引物（與單鏈DNA結(jié)合）的輔助蛋白。引發(fā)體的組裝對正常的染色體復(fù)制和復(fù)制叉停滯后的DNA損傷修復(fù)過程而言都是必須的。大腸桿菌中，存在兩套引發(fā)體分別負責上述兩方面的功能，其中，PriA-PriB-ssDNA-DnaT引發(fā)體復(fù)合物主要負責啟動復(fù)制叉停滯后的DNA損傷修復(fù)過程。結(jié)合復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)及負染電子顯微鏡照片結(jié)果，研究人員首次發(fā)現(xiàn)DnaT蛋白可以和單鏈DNA組裝形成核蛋白細絲，這一發(fā)現(xiàn)提示DnaT蛋白可能在PriA依賴的引發(fā)體組裝過程中起到“腳手架”作用。結(jié)合生物化學分析，研究人員提出了PriA-PriB-ssDNA-DnaT引發(fā)體復(fù)合物可能的組裝模型以及DnaT蛋白在該引發(fā)體組裝及復(fù)制叉停滯重啟過程中所發(fā)揮的功能。

　　該研究結(jié)果對于揭示大腸桿菌引發(fā)體PriA-PriB-ssDNA-DnaT復(fù)合物組裝程序及DnaT蛋白在該過程中發(fā)揮的具體作用具有重大意義，為理解引發(fā)體組裝機理及復(fù)制叉停滯后的DNA修復(fù)啟動機制提供了重要的理論依據(jù)。

    上述研究工作得到了科技部和國家自然科學基金委的資助。

中國科大揭示染色體復(fù)制叉停滯重啟過程中的引發(fā)體組裝新模式